Résumé :
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Le traitement de certains patients atteints de déficits immunitaires demande un système sûr. L'intégration de systèmes de sécurité dans un vecteur lentiviral permet un nouvel espoir pour la thérapie génique. Un des variants de l'Immunodéficience Combinée Sévère (SCID, Severe Combined Immunodeficiencies) est causé par l'absence de la protéine ZAP-70, une tyrosine kinase intervenant dans la voie de transduction de la stimulation antigénique du récepteur des cellules T. La preuve de concept d'une nouvelle stratégie de traitement du SCID a été établie dans notre laboratoire, elle est basée sur l'injection intrathymique de vecteurs lentiviraux. Le vecteur utilisé code pour les protéines ZAP-70 et GFP, grâce à un IRES, sous le contrôle d'un enhancer et d'un promoteur CD4 (Adjali, O., et al. 2005). Afin d'éviter tout effets secondaires indésirables, le vecteur se doit de contenir des systèmes de sécurité, plusieurs modifications sont envisagées : (i) modification des séquences régulatrices de l'expression pour obtenir une meilleure spécificité et un niveau d'expression correct, (ii) utiliser des insulateurs pour réduire le risque oncogénique et (iii) introduire un gène suicide permettant de tuer toutes les cellules contenant le transgène si nécessaire. Le vecteur lentiviral utilisé dans les études précédentes (Adjali, O., et al. 2005) a été modifié pour intégré une séquence régulatrice de 1,1kb du gène CD4 et ainsi améliorer sa spécificité envers les cellules T. En effet, au cours de précédents travaux une expression pouvait être détectée dans certaines cellules B. Les vecteurs modifiés ont été testé in vitro dans différents lignées cellulaires et in vivo dans des souris NOD/SCID ?cnull, montrant leur fonctionnalité. Injecter le vecteur à des patients demande une assurance de progrès et de sécurité que notre laboratoire s'applique à développer.
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