Résumé :
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L'Adeno-Associated Virus recombinant (AAVr) est un outil thérapeutique performant car, lorsque le système immunitaire n'est pas stimulé, le transfert de gène après une seule administration intramusculaire se traduit par une expression permanente du transgène (> 6 ans). Malgré les nombreux succès de l'AAVr dans les modèles murins, le développement préclinique chez le gros animal et clinique chez les patients ont montré que les produits du transgène pouvaient être "d'excellents" antigènes, responsables d'une réponse T cytotoxique destructive dirigée contre les cellules transduites, et/ou de l'émergence d'une réponse humorale neutralisante. L'utilisation d'AAVr pour le transfert de gène dans le muscle évoluant rapidement vers plusieurs applications cliniques, chercher les facteurs impliqués dans l'émergence d'une réponse immune est nécessaire. Nous avons donc voulu déterminer chez le primate : " le sérotype d'AAVr optimal pour la transduction du muscle (AAVr-1 vs AAVr-8) " le mode d'administration optimal selon l'indication thérapeutique (IM vs infusion de membre) " la biodistribution du vecteur (dans la cible elle-même ainsi qu'à distance, en particulier dans les organes lymphoïdes) " l'efficacité immunosuppressive de la protéine LEA29Y, mutant du CTLA4-Ig, actuellement en phase III d'essai clinique. Parce que le modèle primate est un modèle sensible (éthique et coût) et qu'il est particulièrement pertinent pour les études précliniques, nous avons cherché à répondre à ces questions à partir d'une même cohorte de 8 animaux. Quatre d'entre eux ont reçu par injection intramusculaire (IM) ou infusion d'un membre, un AAVr-1 codant pour le LEA29Y. Les quatre autres ont subi le même protocole mais avec un AAVr-8. Nous avons ainsi pu comparer l'efficacité et le profil de transduction, afin d'évaluer l'implication de la nature du sérotype et du mode d'administration de l'AAVr dans l'activation d'une réponse immune dans le muscle. Quatre mois après l'administration d'AAVr-LEA29Y, la même cohorte a reçu par IM, un vecteur AAV-rtTA/Epo. Le système rtTA/Epo permet de réguler de façon réversible l'expression d'érythropoïétine (Epo) recombinante après la prise de doxycycline (Dox). Dans une étude précédente, nous avions montré que, contrairement à la souris, 90% des macaques développent une réponse immunitaire destructive contre le transactivateur rtTA. Nous avons donc utilisé ce modèle préclinique pertinent pour évaluer des immunosuppresseurs de dernières générations tels que le LEA29Y. Nos résultats préliminaires suggèrent que : " la biodistribution du vecteur est semblable après IM ou infusion " le mode d'administration IM est associé à la présence d'infiltrats inflammatoires focaux observables dans le muscle injecté plusieurs mois après administration d'AAVr " le LEA29Y seul n'est pas suffisant pour empêcher une telle réponse immune. Tous ces résultats indiquent que l'injection intramusculaire d'un AAVr chez le primate est associée à une réponse immunitaire délétère, quel que soit le sérotype injecté.
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