Titre : | Vos malades s'interrogent sur ... l'électroporation |
Revue : | Bulletin Myoline, 58 |
Auteurs : | Colloque sur l'électroporation (1er octobre 2001) |
Type de document : | Publication AFM |
Année de publication : | 2001 |
Pages : | p. 2-3 |
Langues: | Français |
Mots-clés : | AFM-Téléthon ; colloque ; électroporation ; in vitro ; mode d'emploi ; modèle animal ; recommandation ; thérapie génique ; transfert de gène |
Résumé : |
Texte intégral de l'article : Initié par l'AFM, un colloque sur l'intérêt de l'électroporation pour le transfert de gènes réparateurs en thérapeutique humaine a eu lieu le 1er octobre 2001. Il a réuni les principaux spécialistes français concernés et a induit la constitution d'un " consortium électroporation " ouvert à des équipes internationales. Electroporation ? L' électroporation est une technique de passage (en grec, porros) de substances à travers une membrane sous l'effet de l'électricité. Elle est appliquée depuis une trentaine d'année à des membranes artificielles et à des cellules en culture. Elle est utilisée chez l'homme dans le traitement de tumeurs où elle permet le passage très localisé de substances anticancéreuses puissantes mais hautement toxiques. Son efficacité dans le transfert de l'ADN "nu" dans les bactéries, les levures et les cellules en culture est démontrée depuis longtemps. Elle est donc fréquemment utilisée pour effectuer des transfections in vitro. Quelles sont les modalités ? La théorie de l'électroporation est encore incomplète. Les champs électriques élevés provoquent sur les membranes cellulaires de multiples effets encore mal compris. Schématiquement, on peut estimer qu'il se forme des " trous " dans la membrane et qu'ensuite une partie des substances à introduire dans les cellules y est transportée sous l'effet du champ électrique (électrophorèse). Ce phénomène s'accompagne de déséquilibres dans la composition ionique de la cellule. Il faut donc trouver les conditions d'application du champ électrique assurant non seulement un bon transfert de l'ADN, mais aussi la réversibilité des effets délétères sur la cellule. La technique de l'électroporation possède un aspect encore semi-empirique, bien qu'il existe sur le marché des appareils performants. Une recherche technologique dans ce domaine est au demeurant souhaitable. L'application de cette technique nécessite de prendre en compte de nombreux paramètres physiques, les principaux étant l'intensité du champ électrique, la fréquence et la durée de son application, la forme du signal électrique, les types d'électrodes. Des précisions pratiques doivent encore être apportées mais il existe un certain consensus pour proposer soit une courte impulsion de 5 millisecondes (ms) avec un champ électrique élevé (800 volts/cm) induisant la formation de pores dans les membranes, suivie d'une impulsion longue de 50 à 100 ms avec un champ modéré (100 à 200 volts/cm) provoquant l'électrophorèse de l'ADN, soit plus simplement plusieurs impulsions moyennes (5 à 10 fois 20 ms de 250 volts/cm environ). Quid des expérimentations ? De nombreuses expérimentations ont été effectuées en particulier chez la souris : électroporation de gènes rapporteurs ou de gènes thérapeutiques, en particulier le gène de l'EPO dans un modèle murin de thalassémie et le gène de la laminine chez la souris dy/dy. Les résultats sont très encourageants car les taux de transfection sont élevés et la durée de l'expression du transgène est longue (tout au moins à l'échelle de la souris). Chez des animaux de plus grande taille, on obtient aussi localement des taux de transfection qui peuvent être très élevés, mais la reproductibilité des résultats d'une expérience à l'autre n'est pas satisfaisante. Même si les résultats de l'électroporation chez l'animal montrent certains aléas, cette méthode semble applicable chez l'homme. En premier lieu, il conviendrait de limiter les essais à de petits groupes musculaires (main, avant-bras) en adaptant la technique et en maîtrisant les effets désagréables et même douloureux liés à l'application des champs électriques. |
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