Titre : | Ciblage de l'expression génique aux lymphocytes B après transfert de gène dans les cellules souches hématopoïétiques humaines : application à la thérapie génique de la maladie de Bruton |
Auteurs : | Moreau T, Auteur |
Type de document : | Thèse/Mémoire |
Année de publication : | 2006 |
Pages : | 145 p |
Langues: | Français |
Mots-clés : | cellule souche ; expression génique ; hématopoïèse ; humain ; immunodéficience ; lymphocyte B ; moelle osseuse ; placenta ; régulation génique ; sang ; souris modèle ; thérapie génique ; transfert de gène ; vecteur lentiviral |
Résumé : |
L’agammaglobulinémie liée à l’X (XLA), ou maladie de Bruton, est le plus fréquent des déficits immunitaires humoraux primitifs. Lié à des mutations du gène codant pour la tyrosine kinase de Bruton (BTK), cette immunodéficience entraîne un blocage intramédullaire sélectif de la maturation lymphocytaire B au stade pro-B. Il en résulte un taux de lymphocytes B périphériques effondré et une hypogammaglobulinémie profonde se manifestant dès les premiers mois de vie par des infections pulmonaires et ostéo-articulaires récurrentes, bactériennes et à entérovirus. BTK est exprimé dans l’ensemble des cellules hématopoïétiques à l’exception des cellules lymphoïdes T et des plasmocytes.
Un promoteur minimal issu des régions régulatrices du gène du CD19 humain a été défini au moyen d’une approche bio-informatique. Nous avons démontré qu’un vecteur lentiviral comportant une séquence régulatrice de 1274pb était capable de restreindre l’expression du transgène à la descendance lymphocytaire B au cours de la différenciation in vivo de progéniteurs CD34+ génétiquement modifiés (Mol.Ther.2004;10:45-56). L’addition de la séquence enhancer murine Eµmar, issue du gène de la chaîne lourde des immunoglobulines, a permis d’améliorer significativement l’activité transcriptionnelle B-spécifique de la casette d’expression. Le gène BTK est exprimé spécifiquement dans les lignées lymphoïdes B et préférentiellement dans les lymphocytes B différenciés à partir de cellules CD34+ transduites issues de sang placentaire ou de moelle osseuse. Le vecteur B-spécifique développé constitue un outil de transfert de gène particulièrement intéressant pour une approche par thérapie génique de la maladie de Bruton. |
Type de thèse : | Thèse |