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Publications AFM

Dystrophie musculaire de Duchenne : saut d'exon, applications cliniques en cours de développement Conférence annuelle de l'association Parent project Muscular Dystrophy, Cincinnati Brignol TN; Biard E Bulletin Myoline (AFM), Savoir & Comprendre, 2004, 74, p.1 Langue : français Texte intégral de l'article : Le saut d'exon, approche thérapeutique utilisant des oligonucléotides antisens (1), a fait l'objet d'un essai pilote chez un patient atteint de dystrophie musculaire de Duchenne (DMD). D'autres applications cliniques sont en cours de développement. Une synthèse a été présentée, en juillet dernier à Cincinnati, lors de la conférence annuelle de l'association Parent Project Muscular Dystrophy (2). La technique du saut d'exon (exon skipping) vise à transformer une " mutation Duchenne " en une " mutation Becker " en restaurant le cadre de lecture. Un décalage du cadre de lecture de la dystrophine est, dans environ 65% des cas, responsable de la DMD. En théorie, la technique du saut d'exon est applicable à environ 80% des exons ciblés dans les cultures cellulaires humaines. Après des tests positifs in vitro et chez la souris mdx, un premier essai clinique a été réalisé au Japon chez un garçon atteint de dystrophie musculaire de Duchenne (DMD), âgé de 10 ans, porteur d'une délétion de l'exon 20. Un oligonucléotide antisens chimérique induisant le saut de l'exon 19 a été utilisé. Il a été administré, dilué dans une solution saline, à la dose de 0,5 mg/kg en perfusion intraveineuse d'une durée de 2 heures. Quatre perfusions intraveineuses ont été effectuées : une par semaine pendant 4 semaines. Une semaine après la dernière perfusion, l'analyse de l'ARN messager a montré que la fin de l'exon 18 était directement raccordée au début de l'exon 21. Une nouvelle dystrophine a pu être détectée dans les cellules musculaires après biopsie. Aucune amélioration de la fonction musculaire n'a été observée pas plus qu'une modification significative des CPK. Un second traitement est prévu un an après l'arrêt de celui-ci. Courant 2005, en Hollande, devrait commencer une étude visant à évaluer l'efficacité et la tolérance d'injections intramusculaires d'oligonucléotides antisens dans le muscle tibial antérieur. Quatre à six patients DMD âgés de 8 à 16 ans devraient être inclus, les exons ciblés étant le 46 (délétion 45) et le 51 (délétions 45-50, 48-50, 52). D'autres équipes (française, anglaise et australienne) travaillent également sur des applications cliniques du saut d'exon. Pour réaliser un saut d'exon, il est possible d'agir au niveau du mécanisme d'épissage (suppression des introns de l'ARN pré-messager) afin d'éliminer un exon spécifique muté décalant le cadre de lecture (interruption prématurée de lecture). Le ou les exons porteurs de la mutation responsable de la pathologie peuvent être éliminés de l'ARN messager grâce à des oligonucléotides antisens. Ce sont, dans la majorité des cas, de courtes structures d'ARN constituées de 20 nucléotides environ dont des séquences sont fabriquées de telle sorte qu'elles s'attachent uniquement à la séquence complémentaire correspondante, à l'intérieur ou aux extrémités, de l'exon devant être éliminé et nulle part ailleurs. Ces oligonucléotides interfèrent alors avec le processus d'épissage de sorte que les exons ciblés ne soient plus inclus dans l'ARN messager. Le saut d'exon intervenant dans la conversion de l'ARN pré-messager en ARN messager entraîne la production d'une dystrophine contenant moins d'acides aminés. Si les acides aminés manquants sont situés dans la région centrale de la dystrophine, la protéine produite peut encore jouer son rôle stabilisateur au niveau de la membrane de la cellule musculaire. Ainsi les symptômes de DMD pourraient être transformés en ceux moins sévères de dystrophie musculaire de Becker. Comme le gène muté n'est pas modifié par la technique du saut d'exon, l'effet des oligonucléotides n'est pas permanent et leur administration doit être répétée. (1) Myoline, 2004, 71 : 2-3 (2) Site internet du Parent Project Muscular Dystrophy Mots-clés :saut d'exon; essai clinique; dystrophie musculaire de Duchenne; dystrophie musculaire de Becker; oligonucléotide antisens; injection intraveineuse; fibre musculaire striée; épissage; souris mdx; Japon; ARN messager

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